طراحی و به کارگیری روش lamp در جهت تشخیص مولکولی استرپتوکوک پیوژنز

مقدمه: استرپتوکوکوس پیوژنز کلونیزه کننده پوست و گلو در بسیاری از انسان ها است. این باکتری علاوه بر عفونت های چرکی حاد، مسئول عوارض و بیماری های خودایمن بعد از عفونت شامل آرتریت واکنشی، گلومرولونفریت و تب روماتیسمی می باشد. روش استاندارد طلایی برای شناسایی استرپتوکوکوس پیوژنز، کشت است. اما به دلیل زمان بر بودن روش مذکور و اهمیت تشخیص سریع آن، استفاده از روش های مولکولی مفید است. تکنیک lamp روش نسبتاً جدیدی است که حساسیت و اختصاصیت بالایی در تشخیص عفونت های باکتریایی دارد. هدف از این مطالعه، استفاده از تکنیک lamp براساس ژن ستوکروم اکسیداز (oxaa) برای شناسایی استرپتوکوکوس پیوژنز است. مواد و روش ها: روش lamp با 6 پرایمر برای توالی خاص oxaa در استرپتوکوکوس پیوژنز طراحی شد. غلظت های مختلفی از سولفات منیزیم، دزوکسی نوکلئوتید تری فسفات و پرایمرها برای بهینه سازی روش استفاده گردید. نتایج: واکنش lamp با غلظت های 10 um از هر کدام از پرایمرهای lb، lf،f3 و b3، 40 um از هر کدام از پرایمرهای fip و bip، 0.4mm dntps و 8mm mgso4 طی 1 ساعت و در دمای 63 درجه سانتیگراد راه اندازی گردید. نتیجه گیری: روش lamp در مقایسه با pcr روش سریعی برای شناسایی استرپتوکوکوس پیوژنز می باشد.